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血清胱抑素C的检测及临床应用
关键字:检测,AB,CD,EF,yz,wx,st,uv,GH,IJ, 发布时间:2011-08-20

?848? 其他原因引起的低血容蕈和低蛋白血症。输用前在37℃水浴 中融化,融化时不断轻轻摇动血浆袋。 冷沉淀 冷沉淀物足FFP在1~5℃条件下分离出的不溶解物再 冷冻后制得,内含有丰富的凝血因子;m管性血友病因子 (VWF)和纤维蛋白原。其主要用于凝血因子,尤其足FVl和 纤维蛋白原缺乏所致出凝血异常患者(血友病、VwD、纤维蛋 白原缺乏症、尿毒症性血小板功能紊乱、DIC、手术后渗血)。 400ml。FFP制备的冷沉淀物为1个包装单位(含80~100 U),容积20~30mL,其中FⅧ>80U,纤维蛋白原(FIB)>150 mg,VWF>60U,血L浆蛋白大于60mg,以及其他各种免疫球 蛋白;一20℃以下(最好一30℃)保存,要求ABO血型同型输 注。输用前。37℃水浴中完全融化后。加生理盐水稀释,4h内 以患者可耐受的速度尽快输完,如末融化,提示纤维蛋白原已 转变为纤维蛋白不能使用。冷沉淀黏度较大,如静脉推注,最 好在注射器内加入少蜃枸橼酸钠溶液,以免注射时发生凝集而 堵塞针头。 综卜所述,成分输ⅡIL不良反应小,既节约资源又便于运输。 近年来我国的成分输血_『l;f用广泛,一般来讲,输注血液和血液 制品不会给患者带来不适,但有的患者也会在输注后发生不良 反应,严重者可能有死亡危险。因此,要遵循科学、合理用10【的 原则,根据病情需要针对性使用,A‘能有效避免给机体带来的 损害和影响。专家认为,失血性休克或出血较多的患者需要大 量输血抢救时,应慎用含有白细胞的血液,且不可在大量出血 时将血液作预防性的输入。对长期依赖输血维持牛命的患者 易产牛发热反应,丰要是由于长期、多次输血,患者体内产生白 细胞抗体造成的。因此,应滤去除白细胞的成分血,应用时要 注意血液的保存期。库存血易发生许多代谢和结构的改变,如 果输注保存时间较长的血液,特别是红细胞,易产牛微小血块, 可引起肺栓塞,同时也口r发牛溶血和血尿。总之,要做到科学、 合理用血,临床医师要加快知识的更新,了解成分输血相关知 识。 参考文献 [1]杨成民,李家增,季阳。等.基础输血学[M].北京:中国科 学技术出版社,2001:363. 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(本文责任编辑张耀元收稿n期:2009—12-25) ?综述? 血清胱抑素C的检测及临床应用 孙 萍综述,郭美琦审校 (天津市第一中心医院检验科300192) 【摘要】血清胱抑素C(CysC)属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族,是1种非糖摹化的碱性低分子蛋白,相对分子质量为 13.559X103,由120个氨基酸组成,是20世纪中期瑞典研究发现的肾小球滤过率((;FR)新指标。CysC基因足“看家基因”,即此 基因在所有组织恒定持续转录及表达。CysC在所有有核细胞都町以表达,产生速度十分稳定,不受感染、肿瘤、饮食、体质量及 肝功变化的影响,易通过肾小球滤过屏障。它在体内唯一代谢途径是通过肾脏排泄,并且在肾小管卜皮细胞内完伞降解,不再重 新回到血液循环中。同时,肾小管也不分泌CysC,血中CysC的浓度主要由GFR决定。因此,CysC有叮能成为较理想的GFR 检测指标。 【关键词】抑素类;肾功能试验;肾疾病;肾移植 D()I:10.3969/j.issn.1673—4130.2010.08.034 中图分类号:R692;R446.61文献标识码:A文章编号:1673-4130(2010)08一0848一03 血清胱抑素C(CysC)作为检测肾功能的1种新的内源性 标志物,近年来受到临床上的广泛重视。它与目liif临床上常用 的反映肾小球滤过率(GFR)的指标,如菊糖清除率、同化素标 志物清除率、内生肌酐清除率(Cer)、血尿素氮(BUN)和血清 肌酐(Scr)等相比具有独特的优点,更为稳定、可靠、方便。 2004年美国FDA批准将它作为检测肾功能的指标之一。本 文就CysC的生物学活性、检测及在临床中的应用作一综述。 CysC的生物学活性及检测 1.CysC的生物学活性CysC属于半胱氨酸蛋白酶抑 制荆超家族,是1种非糖基化的碱性低分子蛋白,相对分子质 量为13.559×103,由120个氨基酸组成。CysC是20世纪中 期瑞典研究发现的能反映GFR的新指标…。CysC基因足 “看家基凶”,即此基因在所有组织恒定持续转录及表达|2l。 CysC在所有有核细胞都町以表达,产生速度十分稳定,不受 万方数据 换页 垦喳坌叁匡芏壅查垫!!生!旦蔓!!鲞蔓!塑丛』坐坚堕:垒坚坚垫!!:里些!!!坠! 感染、肿瘤、饮食、体质量及肝功变化的影响,易通过肾小球滤 过屏障。它在体内唯一代谢途径是通过肾脏排泄,并且在肾小 管卜皮细胞内完全降解,不再重新回到血液循环巾;同时。肾 小管也不分泌CysC,血中CysC的浓度主要由GFR决定,因 此,CysC有可能成为较理想的GFR检测指标f3l。 2.CysC的检测CysC的检测应采用以抗原抗体反应 为理论基础的各种免疫学检测方法。包括单向免疫扩散法 (RID)、放射免疫测定法(RIA)、荧光免疫测定法(FIA)、酶联 免疫吸附法(El。lsA)、颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)、颗 粒增强散射免疫比浊法(PENIA)和溶胶颗粒免疫分析法 (SPlA)。就灵敏度而言,RID最差,EI,ISA、RIA和FIA均较 好,但涉及放射性污染、价格昂贵及测定时间长等,不能实现自 动化,无法满足临床大批量标本测定。ELISA、RIA和FIA虽 然灵敏度略差,但能够实现自动化检测。满足临床需要。CysC 的正常水平主要取决于检测方法,临床应注意检测方法的标 准化。 CysC的临床应用 1.CysC在肾小管疾病中的应用CysC从肾小球自由 滤过后,被肾小管重吸收,重吸收的CysC几乎全部在肾小管 分解代谢,仅有极少量从尿中排泄。因此,理论上,若肾小管发 生病变,其分解CysC能/J减弱,尿中排出的CysC势必会增 加。有学者证实,分别测定52例肾小管疾病患者、47例肾小 球疾病患者和60例健康对照者尿中的CysC,结果显示,有肾 小管疾病者[4],其尿中CysC浓度明显升高,与对照组存在显 著差异,说明CysC浓度在诊断肾小管功能损害方面可能有重 要意义。 2.CysC在糖尿病。肾病中的应用糖尿病肾病(DN)是 糖尿病的丰要并发症,早期诊断极为霞要。国外有报道,对比 13例1型糖尿病患儿和健康对照组的血糖、血清CysC、Cer 和尿微量清蛋白(mAlb)水平,发现患儿体内CysC水平明显 高于健康对照组,且病程越长,血糖控制越差,CysC水平越 高,存在最著差异。有血管并发症(视网膜、肾脏、高血压)者, 其体内CysC水平明显高于无并发症者[5]。Ascic-Buturovie 和Cavaljuga[6]用类似的方法证明,测定血清CysC水平在早 期诊断DN中有重要意义。马骄[7]认为,联合尿mAIb、n。一MG 和Bz—MG的检测对DN的甲.期诊断及其肾功能损害程度的判 断具有一定价值。但是CysC水平对糖尿病早期肾损坏是否 更有意义,还需要更深入的研究。 3.CysC在急性肾功能衰竭(ARF)中的应用ARF传 统的诊断方法主要是根据Scr水平,但scr水平受多种因素的 影响,不能精确反映GFR,特别是在轻、中度肾功能损伤。最 近Villa等邱1对50例ICU患者进行研究,入选者均无基础肾 脏疾病,但有发牛肾衰的高危因素,如血流动力学不稳定、脓毒 症和应用肾毒性药物等。通过观察比较Ser、血清CysC和 GFR,结果显示,CysC与GFR相关性更好。在25例ARF患 者中,19例mL清CysC浓度升高而Scr升高仅5例,提示在诊 断ARF方面CysC町能比Scr更具价值。但芬兰学者对202 例危重患者的研究结果显示,对诊断ARF血清CysC和Scr 浓度问等重要。 4.CysC在肾移植巾应用急、慢性排斥反应免疫抑制 剂治疗的毒性或不良反脯是肾移植手术后需要处理的主要问 题。不论何种情况,及早明确肾功能的损伤程度,都是及时采 取干预措施的基础。目前临床上常用的Scr指标往往小能准 ?849? 确反映肾移植患者肾功能的恶化情况。White和Akbari|9l测 定ll7例肾移植患者的m清CysC和Scr水平,并以Tc-DTPA 法测得的GFR作为标准,全面比较CysC各种推算GFR的公 式(Filler、LcBricon、Larsson和Hoek公式)和7种基于Scr的 推算公式的利弊。结果发现,基于CysC的Filler和LcBricon 公式具有最低的偏差和最高的精确度。Mendiluce等n1对78 例接受肾移植患者进行了动态监测。分别于肾移植后第2、5、 7、15、30天以及第6、12、18个月测定scr、血清CysC和Ccr水 平。结果发现。肾移植术后前5天,血清CysC水平升高并持 续一段时间,这町能与肾移植术后早期接受大剂晟激素治疗有 关,这一时期CysC与Ser及Ccr缺乏相关性。但到移植术后 第18个月,CysC与Ccr相关性良好,认为CysC是评价成人 肾移植患者肾功能的标志物。 5.Cys(:在其他疾病中的应用CysC的检测不仅仪局 限于肾脏病患者,对其他疾病同样具有较好的临床价值。 Koenig等¨叫认为。CysC不仅仅是反映GFR的标志物,并且 在冠心病和心血管病的风险预测上与其他指标互补,尤其在继 发性心m【管病,CysC水平明显增加往往提示预后不良、肝硬 化晚期伴GFR下降。因此,在肝病患者中检测CysC有助于 早期判断GFR下降。有学者认为,在肝硬化患者中检测Scr 和Cer不能正确反映(;FR变化,而CysC检测可以评价GFR。 还有研究表明,60%类风湿关节炎患者CysC明显增高,Scr仅 5%增高,Ccr有57%明显下降。因此证明,CysC上升和Ccr 下降明显相关。 展望 综上所述,CysC特定的生物特性及功能,使其成为比较 理想的GFR标志物。但目前CysC测定还存在许多不足,临 床实际应用中还存在一些问题…】,不能排除不同年龄段、性 别、吸烟和C反臆蛋白等因素对CysC水平的影响。另外,Cys C水平受机体一些疾病状态的影响。如肝病、甲状腺疾病(甲状 腺亢进或减退)等。因此,尚不能采用测定CysC来预测 GFR。故不能取代内牛肌酐清除率在常规实验室的应用,且目 前测定方法属非均相测定法,很难自动化,无法用于急诊。因此 限制了CysC在临床广泛应用n“。近年来,颗粒增强透射免 疫比浊法和颗粒增强散射免疫比浊法均町在自动生化分析仪 一卜进行,使CysC广泛应用于l临床成为可能,具有广泛的发展 前景。 参考文献 [1]MendiluceA,BustananteJ,MartinD,eta1.SerumCysta- tinCasamarkeforrenalfunctioninkidneytransplant patients[J].TransplantProe,2005,37(9):3844. 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(本文责任编辑张耀元收稿日期:2009一11—20) ?综述? 铜绿假单胞菌耐药机制的研究进展 何 萍综述,丁云芳审校 (苏州大学附属儿童医院检验科,江苏苏州215006) 【摘要】铜绿假单胞菌是1种条件致病菌,在健康人皮肤、呼吸道等部位均町存在。随着抗生素的广泛应用,逐渐表现出耐 药性增强。其耐药机制主要涉及整合子、金属蛋白酶的产生和膜微孑L蛋白oprD2缺失、膜外排泵MexAB-OprM、MexEF—OprN以 及铜绿假单胞菌生物被膜等。因此,对铜绿假单胞菌耐药机制的研究,能为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供积极町行的重要 意义。 【关键词】假单胞菌,铜绿;抗药性,细菌;整合酶;金属蛋白酶类 DOI:10.3969/j.issn.1673—4130.2010.08.035 中图分类号:R378.991;R969.3文献标识码:A 文章编号:1673—4130(2010)08—0850—02 铜绿假单胞菌(Pa)是1种条件致病菌,在健康人皮肤、呼 吸道等部f诳均可存在。当机体抵抗力降低或皮肤组织损伤时 可引起菌血症及身体各系统、多部fcc的感染n]。据报道,Pa感 染在院内革兰阴性蔚感染中居首位,是医院感染的重要病原 菌。随着抗牛素的广泛应用,铜绿假单胞菌的耐药率不断上 升。2002年全国细菌耐药性监测网调查发现,该种菌对临床 常用药物的耐药率为15.2%--78.4%tz]。 整合子在耐药中的作用 细菌耐药性主要是细菌的基因突变和外源耐药基因的获 得。细菌耐药基因的获取主要由整合子和转座子等遗传元件 介导,铜绿假单胞菌主要携带I类整合子。I类整合子5,保 守级(5,-CS)为编码整合酶基因(intI1)和启动子序列;3,保 守级(3,-CS)为季胺类消毒剂外排基因(qacE△1)以及功能不 明的orf5序列。5,一CS和3,-CS之间为可携带大量基因的基 因盒,它们可以是p内酰胺酶、金属酶、氨摹糖苷修饰酶、喹诺 酮靶酶[(DNA促旋酶和(或)拓扑异构酶Ⅳ)]变异等耐药基因 整合子通过在质粒和转座子等基因元件卜移动,从而在各菌属 基因中水平转移[3“。整合子通过携带位点特异性重组系统基 因片段,使整合酶从周围环境捕获耐药基因盒并将其组装在一 起,形成巨大的耐药基因多基因座,使细菌具有多重耐药性,其 在多重耐药菌的形成及耐药基因的水平播散中起主要作用【s]。 研究表明,72株intI1基冈检测阳性的Pa中,多重耐药 Pa菌6l株(84.7%),高于敏感菌及耐药菌(8.9%和6.4%, P<O.01),提示多蕈耐药Pa菌中intI1高分布与多事耐药 Pa菌相关。类似研究发现,多重耐药Pa菌中携有I类整合子 遗传标志qacEAl一sull[6。7]。 金属蛩白酶的产生和膜微孔蛋白oprD2缺失 前期众多研究发现,Pa通过产牛碳青霉烯类酶、金属8-内 酰胺酶(IMP一1~17、VIM—l~11、SPM、GIM等)、膜微孔蛋白 oprD2缺失和细胞内主动外排泵,对各种常用抗生素产生耐 药,而金属口一内酰胺酶耐药基因通过质粒或整合子在不同细菌 问水平扩散。最近,杨春霞等¨1通过对北京5所教学医院分离 的213株非重复性哑胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)进行研 究发现,84株有膜微孔蛋白oprD2缺失,其中6株同时产生 IMp-1金属酶,13株单独产生IMP-1金属酶,2株单独产生 VIM-2金属酶,而且金属酶之间有高度同源性。在所有耐药 菌株中,大部分对美罗培南敏感,只有36株oprD2缺失的菌株 对荚罗培南耐药,此种情况可能同时存在外排泵机制[9]。 同时,除oprD2缺失引起Pa耐药外,oprD基因的突变同 样也是引起Pa耐药的原因之一。颜英俊等|。0l在近期的研究 中发现,通过对34株耐亚胺培南(IMP)的Pa临床样本用PCR 方法扩增oprD基因,并进行DNA分析,结果发现,IMP耐药 Pa的oprD基因突变率达92.3%。突变方式有点突变、缺失突 变以及插入突变等。从而引起外膜蛋白oprD茎环结构L2、 L3、IMP主要结合位点氨基酸发生替换和移码突变,导致Pa 对IMP的耐药。国外也有相同报道,Yoneyama和Nakadl妇发 万方数据 换页

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